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飽和油紅O染色液

更新時間:2024-09-26

簡要描述:

飽和油紅O染色液屬于偶氮染料,是很強(qiáng)的脂溶劑和染脂劑,與甘油三酯結(jié)合呈小脂滴狀。脂溶性染料能溶于組織和細(xì)胞中的脂類,它在脂類中的溶解度比在溶劑中大。當(dāng)組織切片置人染液時,染料則離開染液而溶于組織內(nèi)的脂質(zhì)(如脂滴)中,使組織內(nèi)的脂滴呈橘紅色。

       飽和油紅O染色液屬于偶氮染料,是很強(qiáng)的脂溶劑和染脂劑,與甘油三酯結(jié)合呈小脂滴狀。脂溶性染料能溶于組織和細(xì)胞中的脂類,它在脂類中的溶解度比在溶劑中大。當(dāng)組織切片置人染液時,染料則離開染液而溶于組織內(nèi)的脂質(zhì)(如脂滴)中,使組織內(nèi)的脂滴呈橘紅色。


一、飽和油紅O染色液的配制

       脂質(zhì)(Lipid)是中性脂肪、類脂及其衍生物的總稱,其共同的物理特性是不溶于水,易溶于有機(jī)溶劑(如乙醇等)。人體的脂肪主要有兩種:1、儲存脂肪,如中性脂肪,主要分布于皮下、腎、胰腺等部位。2、結(jié)構(gòu)脂肪,如類脂(磷脂、糖脂、膽固醇等),主要分布于細(xì)胞內(nèi)。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油組成的脂類,呈中性。中性脂肪是儲存能量的方式之一,在氧化時釋放出能量。中性脂肪染色經(jīng)常采用蘇丹Ⅱ、蘇丹Ⅲ、蘇丹Ⅳ、蘇丹黑B、油紅O法等。傳統(tǒng)方法采用蘇丹染料,近發(fā)現(xiàn)偶氮染料油紅O更適合脂肪的染色。油紅O是很強(qiáng)的脂溶劑和染脂劑,較易不甘油三脂結(jié)合呈小脂滴狀,不磷脂結(jié)合力稍差,其染色原理一般認(rèn)為是物理上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂肪染色。染料在細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)的溶解度較原溶劑中的溶解度更大,所以在染色時染料就從有機(jī)溶劑轉(zhuǎn)移入脂質(zhì)而使脂肪染色。


      飽和油紅O染色液(細(xì)胞)簡稱ORO染色液,可顯示小的脂滴,可優(yōu)先為脂類從溶劑中吸附染料。標(biāo)本不采用含有乙醇的固定液,如需要固定可采用10%福爾馬林)。脂肪陽性染色結(jié)果呈橘黃至紅色,但具體顏色因脂質(zhì)濃度而定。


1.油紅O 1g

異丙醇 100ml

2.油紅O 足量

異丙醇 100ml

配成油紅O飽和溶液,使用時以油紅O飽和液一份加蒸餾水兩份,過濾后使用。


二、染色程序

1.切片用甲醛―鈣固定10分鐘;

2.蒸餾水洗;

3.60%異丙醇浸洗;

4.1由紅O染液10分鐘(染液可回收再利用);

5. 60%異丙醇分色至背景五色;

6.蒸餾水洗;

7.Mayer蘇木精復(fù)染;

8.自來水洗(藍(lán)化)1~3分鐘;

9.蒸餾水洗;

10.甘油明膠封片。


結(jié)果:組織細(xì)胞中脂滴呈橘紅色,核呈藍(lán)色。

油紅O脂類染色澄  顯示大鼠脂肪肝中肝細(xì)胞內(nèi)染為紅色大脂



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